domingo, 29 de noviembre de 2015

ADN recombinante en la naturaleza

La ingeniería genética ha permitido tratar a los pacientes con diabetes, mediante la utilización de ADN recombinante, este mecanismo permite que la insulina humana pueda producirse en otros organismos y así poder utilizarla para el tratamiento de pacientes.

Primero: debemos aislar el gen.




Segundo: se debe preparar el ADN diana.

Tercero: insertar el gen de la insulina en el plásmido para su recombinación.

Cuarto: insertar el plásmido en la célula que puede ser una bacteria.



Quinto: el plásmido se multiplica, cuando la bacteria se reproduce también contiene el gen de insulina.
Sexto: las moléculas de insulina humana producidas por las bacterias deben ser purificadas.



Séptimo: muchas personas con diabetes se tratan con insulina producida por bacterias.


Bibliografía

domingo, 15 de noviembre de 2015

Prueba de tamizaje e DM y Pruebas confirmatorias

Pruebas de tamizaje para detección de diabetes mellitus

Primeramente debemos conocer que una prueba de tamizaje, también llamada de screening, es un método para identificar en una población sana a individuos que padezcan alguna enfermedad sin presentar síntomas, son menos complejas que las pruebas confirmatorias para la enfermedad. 
Analizaremos 2 pruebas de tamizaje:

     Examen de glucemia


Es un examen que mide la concentración de glucosa en la sangre, podemos tomar como referencia:

- Para definir si el resultado es normal o no, se establecieron escalas o umbrales:
Por debajo de los 70 ml/dl: si el valor es inferior a 70, se dice que hay hipoglucemia, es decir, el nivel de glucosa en sangre está por debajo de lo normal.

- Entre 70 y 110 ml/dl: si el resultado oscila entre estos dos umbrales, entonces la glicemia del paciente es normal.

- Entre 110 y 126 ml/dl: este rango recibe el nombre de “glucosa alterada en ayuno”. Puede considerarse que el paciente está en un estado de prediabetes, y existe cierto riesgo de desarrollar diabetes tipo II.

- Por encima de los 126 ml/dl: cuando el resultado indica 126 o más miligramos de glucosa en sangre, entonces el médico puede diagnosticar diabetes.


   

Prueba de tolerancia a la glucosa (PTOG)

La prueba de tolerancia oral a la glucosa (PTOG) consiste en la medición de la glucemia dos horas después de dar una carga oral de 75 gramos de glucosa.


Para la realización de la PTOG la persona debe ingerir 75 gramos de glucosa diluidos en 300 ml de agua con o sin sabor, a temperatura ambiente, en un período no mayor de cinco minutos. Además debe reunir las
siguientes condiciones:

- Ayuno de ocho a 14 horas (se puede tomar agua)
- Evitar restricciones en la dieta durante los tres días precedentes (consumo mínimo de 150 gramos de hidratos de carbono al día). La evidencia reciente sugiere que es conveniente consumir la noche anterior una comida con un contenido razonable de carbohidratos (30-50 g)
- Evitar cambios en la actividad física habitual durante los tres días precedentes
- Durante la prueba debe mantenerse en reposo y sin  fumar.
- Es preferible que no tenga una infección u otra enfermedad intercurrente. De lo contrario, debe quedar consignada en el informe de la prueba.
- Debe interrumpir el consumo de medicamentos que pudieran alterar los valores de la glucemia mínimo 12 horas previas a la realización de la prueba. De lo contrario, deben quedar consignados en el informe de la prueba
- La PTOG no se debe practicar en pacientes con VIH positivo que estén recibiendo inhibidores de proteasas por el alto número de resultados de glucemia falsamente positivos.
- En niños la PTOG rara vez se utiliza, pero cuando se requiere la carga de glucosa se calcula con base en 1.75 g por kg de peso sin exceder 75 g en total.  




Diagnostico Diabetes MellitusGlucemia en ayunasGlucemia en PTOG
mg/dlmmol/Lmg/dlmmol/L
Plasma o suero venoso > 126> 7> 200> 11.1
Sangre total venosa> 110> 6.1> 180> 10
Plasma capilar> 126> 7> 220> 12.2
Sangre total capilar> 110>6.1>200> 11.1

Pruebas confirmatorias:

  • Determinación de glucosa en sangre
  • Diagnostico de hemoglobina glicosilada (Hba1c)
  • Determinacion de anticuerpo por metodo de ELISA

Los síntomas como poliuria, polidipsia, polifagia, astenia o cetoacidosis conllevan a la sospecha clínica de la diabetes. 
Sin embargo, el diagnóstico de diabetes se confirma mediante determinación de glucosa en sangre, que se realizan ante situaciones de sospecha clínica o bien en estudios  de detección sistemática (diagnóstico de diabetes gestacional y estudios epidemiológicos); otro método confirmatorio para la diabetes es el diagnóstico la hemoglobina glicosilada (Hba1c), la cual es una heteroproteína de la sangre que resulta de la unión de la Hb con carbohidratos libres.  

sábado, 14 de noviembre de 2015

MicroRNAs en DM

MicroRNAs en DM

Los microRNAs son pequeñas moléculas de RNA de 19 a 23 nucleótidos que actuan como reguladores de la expresión en células eukariotas induciendo el arresto translacional y degradación de mRNAs. estos son potentes conductores de diferenciacion y desarrollo y su desregulación ha estado asociada a varias enfermedades, incluyendo la diabetes miellitus.

En la DM tipo 1 la falta de insulina es principalmente causada por la ausencia o destrucción de celulas beta pancreáticas. una gran cantidad de miRNAs ha sido implicada en el desarrollo del páncreas y de las células beta, tales como: miR-15a/b, miR-16, miR-195, miR-503, miR-541, miR-214, miR-9, miR-124a, miR-503, mR-541, miR-214, miR-9, miR-124a, miR-7, miR-376 y miR-375 entre otros. existe una necesidad de estudios mas detallados del rol de estos miRNAs en diabetes pero está claro que las mutaciones o falta de expresión de estos puede desembocar patologías de las celulas beta del pancreas.

En la DM2, encontramos que el rol de los miRNAs ha sido ampliamente estudiado pero no entendido por completo, ocmo ejemplo de esto encontramos al MIr-375. En los islotes de células beta adultas los niveles de miR-375 disminuyen cuando grandes niveles de glucosa están disponibles, bajos niveles de miR-375 inducen secreción de insulina por de-repression de sus objetivos Mtpn y PDK1, mientras que la expresión excesiva de miR-375  atenua la proliferacion y la transcripsión del gen de la insulina y reduce la secreción de insulina inducida por glucosa.

Bibliografía

American Diabbetes Asociation. Selene L. Fernández-Valverde, 
 Ryan J. Taft y   John S. Mattick 2011.Disponible en: http://diabetes.diabetesjournals.org/content/60/7/1825.full